产品货号:
LA10746
中文名称:
溶酶体绿色荧光探针
英文名称:
LysoTracker Green DND-26
产品规格:
50μl|1mL
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价
分子式 | C18H26BClF2N4O |
分子量 | 398.7 |
光谱特性 | Ex/Em=504nm/511nm |
外观 | 黄色溶液 |
结构式 |
组分 | 50μL | 1mL |
溶酶体绿色荧光探针(1mM) | 50μL | 50μL×20 |
说明书 | 1份 | 1份 |
保存:-20℃,避光,避免反复冻融。
以下方法仅供参考。使用前,先将本品取出回温至室温,并对其进行简短离心使DMSO溶液集中于管底。最佳工作浓度需根据不同的实验要求、细胞类型、细胞或组织的膜通透性等进行优化。
- 工作液的配制
利用培养基或合适的缓冲液将1mM储存液稀释至工作浓度,推荐工作液浓度为50~75nM;
注:
① 为了降低探针加载过度可能引起的假阳性,建议在不影响染色效果的情况下尽量使用低浓度。
② 若细胞在染色后于不含染料的培养基中孵育,会观察到荧光信号的衰减和细胞的空泡化现象。 - 染色
- 对于贴壁细胞
- 将细胞置于培养皿中的盖玻片上,加入合适培养基,使其爬片生长。
- 待细胞生长到合适丰度,吸除培养液,加入适量37℃预热的含探针工作液。于生长状态下孵育30min~2h(具体孵育时间需根据细胞类型而定)。
注:对Lysotracker Green DND-26内化过程的动力学研究表明,活细胞摄取此染料仅需数秒即可。缺点在于此探针可能引起溶酶体产生“碱性效应Alkalizing effect”,也就是说过长孵育时间会诱导溶酶体pH值提高。建议仅当该探针于37℃孵育细胞1~5min才可用作pH指示剂。 - 利用新鲜培养基替换上述染色液并在荧光显微镜(含合适滤片)下观察。若染色不够充分,建议增加染料浓度或延长染色时间。
- 将细胞置于培养皿中的盖玻片上,加入合适培养基,使其爬片生长。
- 对于悬浮细胞
- 离心,吸除上清。
- 利用37℃预热的探针工作液重悬细胞,于生长状态下孵育30min~2h(具体时间需根据细胞类型而定)。
- 离心,吸除染色液,加入新鲜培养液重悬细胞。
- 置于荧光镜下观察。若染色不够充分,建议增加染料浓度或加长染色时间。
注:对于悬浮细胞,也可将细胞贴附于经BD Cell-Tak处理过的盖玻片上,然后使用类似于贴壁细胞的方法进行染色。
- 离心,吸除上清。
- 对于贴壁细胞
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